NVD是1997年在马来西亚森美兰州双溪尼帕新城(Perak州Nipah城),首次发现的一种严重危害家畜、家禽和人类的新病毒性传染病 1998年10月至1999年5月期间,NVD在马来西亚猪群和人群中大规模爆发流行,致使265名养猪工人发病,105人死亡,116头猪被捕杀,随后本病又秧及到新加坡 自2000年2月以来,此病再度在马来西亚流行,引起该国和周边国家的恐慌和广泛关注 1 1 理化特性通过负染技术可知尼帕病毒是多型的,病毒颗粒大小为120~500nm,由包膜及丝状的核衣壳组成,核衣壳直径19±2nm,螺距5±0 4nm,包膜膜突长度17±1nm 包膜含有两个转膜蛋白:细胞受体结合蛋白(G:糖蛋白;H:血细胞凝集素;HN:血细胞凝集素/神经氨酸酶),和一个分开的融合蛋白 该病毒体外相当不稳定,对热和消毒药物抵抗力不强,加热56℃,30min即被破坏,用肥皂等清洁剂和一般消毒剂很容易灭活 该病毒在vero BHK、PS细胞系中生长良好 1 2 分子生物学特性分别来自喉分泌物及脑脊液的马来西亚分离株,其全基因组序列已测出,基因组全长18246bp,其基因组结构见图1 它比亨德拉病毒(Hendrvirus,HV)多12个核苷酸,二者核苷酸一致性达70%~78% 这一相似性充分说明了二者紧密相关,但又是不同的病毒(图略) 图1:Npsh病毒的合团组结构NV基因组是由六个转录单位及3’和5’端的非翻译区所组成 六个转录单位为N、P、M、F、G L,它们分别翻译为核衣壳蛋白(nucleocapidpro-tein)、磷蛋白(phosphoprotein)、膜蛋白(matrixpro-tein)、融合蛋白(fusionprotein)、糖蛋白(glycopro-tein)、大蛋白(largeprotein) 其中P基因由于内部翻译启动位点、重叠阅读框架和特殊的转录过程,可产生不同的多肽产物,如P蛋白、V蛋白、C蛋白 3’引导序列,含有转录正链mRNA所需的启动子 5’端含有病毒复制、合成负链RNA所需的启动子 3’和5’基因末端的前12个核苷酸高度保守并互补,NV这种结构同HV具有很高的一致性 表1显示了NV基因长度及同HV的比较 NV各个基因的启动基因、终止基因及连接基因都已经分析清楚,对研究NV分类学具有重要的作用,说明NV是一新型病毒 NV具有广泛的宿主范围,如猪、人、猫、犬、表INipah病毒基因长度及同Hendra病毒的比较基因病毒氨基酸长度(mm)开放阅读框架5’非翻译区3’非翻译区一致性(%)核苷酸一致性(%)一致性(%)核苷酸一致性(%)一致性(%)核苷酸一致性(%)NHendraNipah53253292 178 4575766 756841 1PHendraNipah70770967 670 510510541 946946940 9VHendraNipah545181 188 5CHendraNipah16616683 285 0MHendraNipah35235289 077 110010040 020020040 0FHendraNipah54654688 174 227228444 141841241 4GHendraNipah60460283 370 823323343 851650445 6LHendraNipah2244224486 873 015315354 0676758 2马、蝙蝠等 对马来西亚300个蝙蝠的病毒分离株进行RT-PCR分析,都没有证明蝙蝠是NV的贮存库 因此,最早引起此病爆发的NV的宿主来源,依旧是一难题 病毒在猪的扁桃体、呼吸道上皮组织和呼吸道受感染细胞碎片中繁殖,并通过咽喉部和气管分泌物传播的可能性较大 也有报道分析,脑炎及肺水肿,限制了病毒的传播,外排途径可能是通过泌尿系统,或与有病毒感染的体液接触 同一猪场内传播也可能是直接接触病猪的尿 体液、气管分泌物等而引起,此外也可能是通过使用同一针头及人工授精器械等方式传播 在尼帕病毒感染人的途径中,猪起了关键的作用 病人主要是通过伤口与感染猪的分泌液、排泄物及呼出气体等接触而感染 本病临床症状为:发热、严重头痛、肌痛、脑脊膜炎 猪感染本病的潜伏期大约为7~14天 不同年龄的猪临床症状有所不同 一般表现为神经症状和呼吸道症状,且发病率高,死亡率低 断奶仔猪和肉猪,高烧、呼吸困难伴有轻度或严重的咳嗽,呼吸音粗厉,严重的病例可见咳血 怀孕母猪症状更明显,肺炎,流出脓性分泌物,甚至流产,同时由于严重呼吸困难,局部肌肉痉挛,麻痹而亡 人感染后,潜伏期大约为1~3周,颈、腹部痉挛是与其它脑炎病毒相区别的具有诊断意义的症状 开始发热、头痛,随后出现嗜睡和定向力障碍 在24~48小时后可进一步发展为昏迷,三分之一病人会在昏睡中死亡,耐过昏迷的患者出现永久性脑损伤 少数病人有呼吸道症状,部分病人伴有高血压和心动过速 利用免疫组织化学技术对此病的致病机理及传染性进行研究发现,此病毒主要具有嗜内皮向性和嗜神经向性,另外还具有嗜气管、支气管向性及嗜膜间质和外膜向性 此病毒嗜血管内皮细胞,导致水肿,引起间质性肺炎(肺水肿)、脑脊膜炎、肾小球萎缩及胎盘感染 随着病程延长,内皮细胞发展为多核巨细胞,临床表现为急性呼吸道疾病,明显的神经系统疾病 病毒嗜膜间质和外膜向性,导致血管疾病,但没有明显的临床特征 嗜神经向性,病毒核衣壳集中在神经胶质细胞中、大脑皮质、脑干中,并延伸至实质组织,呈现弥散性血管炎,并伴有广大区域稀疏坏死,从而引起严重的神经系统疾病 广泛的血管炎表现,大部分内皮损伤贯穿于脑皮质和皮下,脑脊液中病毒复制活跃,这三者与死亡率增高有关 病毒分离是最重要、最基本的诊断方法,对于一新型病例,分离病毒是最理想的 病毒分离株的进一步鉴定,还需做电镜或免疫电镜、特异性抗血清中和实验、PCR等严格的质量控制实验 免疫组织化学抗兔抗鼠多聚葡聚糖连接的碱性磷酸酶,取代了生物素一亲和素过氧化物酶的检测系统,经济、方便 免疫电镜技术:尽管繁琐,但对研究致病机理 病理变化是最合适的 血清中和试验:有报道血清可能引起细胞毒性,但对血清质量要求低,是可靠的实验方法 间接ELISA法检测IgG抗体:主要是特异性的问题 病毒抗原的纯化损失较大,现已发展了基因工程抗原,利用杆状病毒表达系统会成的重组G和M蛋白抗原,已用于实验中,但还没有用于日常诊断 此技术成功,不仅可解决抗原的用量,也可解决质量特异性问题 尽管ELISA的特异性大于95%,但也存在假阳性问题 虽然如此,ELISA仍可作为一个非常有效的筛选工具,用于日常监测 PCR技术:发展时间较短,但此技术应用范围非常广泛,任一基因区段皆可进行PCR技术检测,Nipah病毒N基因区域高度保守,在此区域设计引物,利用RT-PCR技术检测RNA,不易漏检 此方法灵敏度高,机体在免疫抗体产生之前或甚微时,即可检测到RNA病毒,及早发现问题,防患于未然 尼帕病毒病发生后,封锁感染猪场,捕杀病猪和疑似感染猪及同群猪,加以深埋处理,烧毁猪舍,并对感染猪场进行全面彻底的消毒,以消灭或减少传染源 同时禁止疫区猪只向外转运,以防止疫情的蔓延;并对猪、马等易感动物,以及养猪从业人员和与猪密切接触的人员,进行紧急免疫接种 除按常规脑炎治疗外,抗病毒药Ribavirin正在试用中 广泛灭蚊,清除积水,以消灭蚊子滋生地,也是防止病原传播的重要措施 注意日常管理,定期对猪进行检疫监测,防重于治,减少对于人和动物的危害 2023年9月13日,印度卫生部长曼达维亚证实,印度南部喀拉拉邦报告两例尼帕病毒死亡病例 当地时间2024年7月21日,印度喀拉拉邦一名14岁男孩因感染尼帕病毒而死亡 据印度媒体报道,当地时间2023年9月15日,印度喀拉拉邦报告6人感染尼帕病毒,有700多人正在接受观察 此前,印度卫生部长证实,喀拉拉邦报告2例尼帕病毒死亡病例 2024年7月20日,印度喀拉拉邦政府证实,该邦默勒布勒姆地区确诊一例尼帕病毒感染病例,感染者是一名14岁男孩,7月21日死亡
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